Дипломная работа: Изучение обменных свойств мягких контактных линз по отношению к ципрофлоксацину
Через определенные промежутки времени (30 мин) извлекали линзу из первой склянки с водой или физраствором и помещали в следующую склянку с таким же объемом. Для сравнения проводили десорбцию в общий объем воды или физраствора при соответствующем времени выдержки. Опыты повторялись несколько раз.
Анализ полученного раствора после вымачивания линз в воде (физрастворе) проводили следующим образом: 1 мл испытуемого раствора вносили в стандартную мерную колбу объемом 50 мл, добавляли 5 мл 1 М хлористоводородной кислоты и доводили до метки бидистиллированной водой. Снимали показания поглощения в ячейке l = 1 см при длине волны 277 нм против 0,1 М HCl в качестве раствора сравнения.
Массу десорбированного ципрофлоксацина mвозв вычисляли по формуле (3.1).
Методика модифицирования МКЛ
Модификацию линз проводили нагреванием их в 2%-ом растворе NaOH при 950С в течение 2 часов. Раствор NaOH готовили из точной навески массой 2,000 г порошка NaOH, растворяя ее в колбе объемом 100 мл водой (вода бидистиллированная). Затем полученный раствор переносили в пластмассовую склянку [2].
А затем изучали сорбцию и десорбцию ципрофлоксацина линзами из материала «Кемерон» по имеющимся методикам.
4. Результаты эксперимента и их обсуждение
Для решения поставленных в работе задач по изучению сорбции - десорбции ципрофлоксацина МКЛ из материала «Кемерон-1» выбрана чувствительная спектрофотометрическая методика [13,14], использующаяся для контроля его содержания в таблетках и каплях. При этом определение ведется по собственному поглощению вещества в солянокислом растворе (разд. 3.4.1).
4.1 УФ - спектр ципрофлоксацина
Согласно литературным данным [12] максимум поглощения в спектре солянокислых растворов приходится на 276-278 нм, что согласуется с полученными данными (рис. 4.1).
Рис. 4.1. Вид УФ-спектра ципрофлоксацина с концентрацией 5 мкг/мл в 0,1 М растворе HCl.
Вид спектра и положение максимума зависит от рН среды из-за присутствия карбоксильной группы и обусловлен сложной сопряженной структурой молекулы, приводящей к формированию нескольких максимумов поглощения. Необходимость растворения в кислоте связана с протонированием вторичного атома азота, что приводит к увеличению растворимости по сравнению с растворимостью в воде. Поэтому при проведении всех исследований в растворе создавалась постоянная концентрация HCl - 0,1 моль/л. Величина экспериментального молярного коэффициента поглощения для раствора ципрофлоксацина в глазных каплях «Ципромед» составляет 43500 ± 400 М-1см-1 (разд. 4.2), что близко к 44800, приведенному в работе [12]. Кроме того, форма основной полосы поглощения и плеча в длинноволновой области не зависят от производителя капель. Наличие компонентов минимально в составе глазных капель «Ципромед» (указано присутствие 0,022% бензалкония хлорида при содержании ципрофлоксацина 0,3 %).
4.2 Характеристики
градуировочной зависимости
для определения ципрофлоксацина
В выбранных условиях была получена градуировочная зависимость оптической плотности солянокислого раствора ципрофлоксацина при 277 нм от его концентрации. Получилась линейная градуировочная зависимость в диапазоне концентраций ципрофлоксацина от 9,00*10-7 моль/л до 2,17*10-5 моль/л (0,3 мкг/мл до 7,2 мкг/мл), проходящая через начало координат. Полученные данные представлены на рисунке 4.2 и в таблице 4.1.
Рис. 4.2.
Градуировочная зависимость оптической плотности раствора при 277 нм от
концентрации ципрофлоксацина
Характеристики градуировочной зависимости для разных способов выражения концентрации (коэффициент a – незначим):
|
b = 43500; S2yx = 2,12*10-5; S2b = 26030; S2a = 2,96*10-6; y = (43500 ymin = 0,005; xmin = Cmin = 1,99*10-7 моль/л. |
b = 0,131; S2yx = 1,69*10-5; S2b = 1,88*10-7; S2a = 2,35*10-6; y = (0,131 ymin = 0,005; xmin = Cmin = 0,059 мкг/мл. |
400)x;
0,001)x;Таблица 4.1
Зависимость оптической плотности раствора при 277 нм от концентрации ципрофлоксацина
|
с*105, моль/л |
ст, мкг/мл |
А |
с*105, моль/л |
ст, мкг/мл |
А |
| 0,09 | 0,3 | 0,033 | 0,54 | 1,8 | 0,238 |
| 0,09 | 0,3 | 0,033 | 0,54 | 1,8 | 0,239 |
| 0,18 | 0,6 | 0,073 | 1,09 | 3,6 | 0,469 |
| 0,18 | 0,6 | 0,073 | 1,09 | 3,6 | 0,469 |
| 0,27 | 0,9 | 0,119 | 1,63 | 5,4 | 0,701 |
| 0,27 | 0,9 | 0,111 | 1,63 | 5,4 | 0,706 |
| 0,36 | 1,2 | 0,158 | 2,17 | 7,2 | 0,939 |
| 0,36 | 1,2 | 0,159 | 2,17 | 7,2 | 0,949 |
Для дальнейшего удобства расчетов и представления результатов концентрация ципрофлоксацина будет представлена в мкг/мл.
Следует отметить, что характеристики градуировочной зависимости практически не изменяются в присутствии физраствора.
Допустимые пределы содержаний ципрофлоксацина в каплях 0,270 – 0,330 % (г/100 мл). В разных образцах капель концентрация ципрофлоксацина варьировалась от 2,50 до 3,30 мг/мл (от 0,25 до 0,33 %). Поэтому перед исследованием сорбции десорбции несколько флаконов капель сливалось вместе, и уже в усредненном растворе определялась исходная концентрация.
Концентрация ципрофлоксацина в одном из образцов глазных капель «Ципромед», установленная спектрофотометрическим методом составила (3,15 ± 0,02) г/100 мл. Результаты представлены в таблице 4.2.
Таблица 4.2
Воспроизводимость определения концентрации ципрофлоксацина в каплях спектрофотометрическим методом
|
А277 |
ст , мкг/мл (в фотометрируемом растворе) |
w, % , (в каплях) |
| 0,331 | 2,52 | 0,315 |
| 0,332 | 2,53 | 0,316 |
| 0,332 | 2,53 | 0,316 |
| 0,330 | 2,51 | 0,314 |
| 0,331 | 2,52 | 0,315 |
| 0,331 | 2,52 | 0,315 |
|
|
± С = 0,315 ± 0,0024.3 Результаты исследования обменных свойств МКЛ и их обсуждение
Отработанная методика и полученная по ней градуировочная зависимость использовались при исследовании обменных свойств мягких контактных линз по отношению к раствору капель «Ципромед».
Сорбция и десорбция проводились в статических условиях. Использовали модельные калиброванные линзы диаметром 12,0 мм, толщиной 0,60 мм. Масса линз представлена в таблице 3.1.
4.3.1 Результаты исследования сорбции ципрофлоксацина МКЛ
Динамику сорбции ципрофлоксацина линзами из материала «Кемерон» изучали следующим образом: каждую предварительно насыщенную (до постоянной массы) линзу замачивали в 2 мл капель на 1, 2, 3, 5 часов и сутки. Все это делалось в разных опытах. По истечении этого времени линзы извлекали, а оставшийся раствор анализировали в соответствии с отработанной методикой, отбирая на анализ определенную аликвоту раствора (1 мл). Результаты представлены в таблице 4.3 и на рисунках 4.3, 4.4.
Таблица 4.3
Результаты изучения сорбции ципрофлоксацина линзами из капель «Ципромед»
| t, ч |
mп/погл, мг |
мг |
mпогл, мг |
mпогл/ mлинзы, мг/г |
mпогл/ mисх, % |
| 0,5 | 5,00 | 5,06 | 1,01 | 9,52 | 16,8 |
| 0,5 | 5,08 | ||||
| 0,5 | 5,10 | ||||
| 0,5 | 5,06 | ||||
| 1 | 4,86 | 4,83 | 1,39 | 13,0 | 22,5 |
| 1 | 4,79 | ||||
| 2 | 4,58 | 4,60 | 1,66 | 15,6 | 26,5 |
| 2 | 4,61 | ||||
| 3 | 4,78 | 4,79 | 1,51 | 14,3 | 24,0 |
| 3 | 4,79 | ||||
| 5 | 4,57 | 4,57 | 1,68 | 15,6 | 27,0 |
| 16 | 4,62 | 4,62 | 1,50 | 14,14 | 25,0 |
| 24 | 4,79 | 4,71 | 1,60 | 15,0 | 26,0 |
| 24 | 4,62 |
п/погл,
Рис. 4.3. Зависимость степени извлечения ципрофлоксацина из препарата от времени сорбции
Рис. 4.4. Зависимость степени сорбции ципрофлоксацина из препарата
от времени сорбции
Для оценки воспроизводимости результатов сорбции была проведена серия опытов, где было задействовано четыре линзы с приблизительно одинаковыми массами (0,3179 г, 0,3159 г, 0,3167 г, 0,3239 г). Линзы (каждую отдельно) замачивали в 2 мл раствора капель «Ципромед» 2 часа. Полученные данные представлены в таблице 4.4.
Таблица 4.4
Воспроизводимость результатов сорбции ципрофлоксацина МКЛ (время сорбции 2 часа)
|
mп/погл, мг |
mпогл, мг |
mпогл/ mлинзы, мг/г |
mпогл/ mисх, % |
|
| 4,58 | 1,67 | 15,70 | 27 | |
| 4,61 | 1,64 | 15,44 | 26 | |
| 3,99 | 1,58 | 14,86 | 28 | |
| 4,02 | 1,55 | 14,33 | 28 | |
| 4,04 | 1,53 | 14,38 | 27 | |
| 4,10 | 1,47 | 13,66 | 26 | |
| 4,44 | 1,76 | 16,56 | 28 | |
| 4,57 | 1,63 | 15,06 | 26 | |
| 4,52 | 1,69 | 15,88 | 27 | |
| 4,69 | 1,52 | 14,13 | 24 | |
|
|
4,36±0,20 | 1,60±0,06 | 15,0±0,6 | 26,7±0,9 |
|
Sr,% |
6,5 | 5,6 | 6,0 | 4,7 |
